Calcul de reconstitution

Comment reconstituer une protéine ou un peptide lyophilisé

1. Choisissez de calculer le volume à ajouter pour une concentration, ou la concentration à partir d’un volume.
2. Saisissez la quantité du flacon d’après l’étiquette ou la fiche technique, et la concentration visée ou le volume que vous ajoutez.
3. Ajoutez la masse moléculaire pour voir la concentration molaire, et un volume d’aliquote pour voir combien d’aliquotes vous obtenez.

Questions fréquentes

Quelle est la formule ?

Volume = quantité ÷ concentration. 1 mg dissous à 1 mg/mL demande 1 mL ; 100 µg à 0,5 mg/mL demandent 200 µL.

Quel solvant utiliser ?

Celui de la fiche technique : souvent de l’eau stérile ou un tampon comme le PBS, et parfois un peu d’acide acétique, de DMSO ou un autre solvant pour les peptides peu solubles dans l’eau.

Puis-je passer au vortex ?

Centrifugez d’abord le flacon pour ramener la poudre au fond, ajoutez le solvant le long de la paroi et mélangez doucement en faisant tourner ou en pipetant lentement. Un vortex vigoureux peut dénaturer les protéines.

Pourquoi aliquoter ?

Congeler et décongeler un stock encore et encore peut abîmer une protéine. Répartissez-le en aliquotes à usage unique et gardez-les congelées.