प्रोटीन सांद्रता कैलकुलेटर (A280)

A280 से प्रोटीन सांद्रता कैसे निकालें

1. A280 रीडिंग, तनुकरण गुणांक और पथ लंबाई लिखें।
2. चुनें कि विलोपन गुणांक कहाँ से आए: प्रोटीन अनुक्रम चिपकाएँ, मोलर गुणांक और आणविक भार लिखें, या Abs 0.1% लिखें।
3. सांद्रता mg/mL में दिखती है, और आणविक भार पता हो तो µM में भी।

अक्सर पूछे जाने वाले सवाल

अनुक्रम से विलोपन गुणांक कैसे निकलता है?

Pace और साथी (1995) की विधि से: हर ट्रिप्टोफ़ैन के लिए 5,500 M⁻¹ cm⁻¹, हर टायरोसीन के लिए 1,490 और हर सिस्टीन जोड़ी (डाइसल्फ़ाइड बंध में दो सिस्टीन) के लिए 125। सिस्टीन मुक्त हों तो अपचयित चुनें।

Abs 0.1% क्या है?

1 cm सेल में 1 mg/mL घोल का 280 nm पर अवशोषण, यानी विलोपन गुणांक को आणविक भार से भाग। mg/mL में सांद्रता = A280 ÷ Abs 0.1%।

मेरे प्रोटीन के लिए यह क्यों नहीं चलता?

जिन प्रोटीनों में न ट्रिप्टोफ़ैन है न टायरोसीन, वे 280 nm पर लगभग कुछ नहीं सोखते। Bradford या BCA जैसा रंजक परीक्षण करें, या 205 nm पर मापें।