단백질 농도 계산기(A280)

A280으로 단백질 농도를 구하는 방법

1. A280 측정값, 희석 배수, 광로 길이를 입력합니다.
2. 흡광 계수를 구하는 방법을 고릅니다. 단백질 서열을 붙여 넣거나, 몰 흡광 계수와 분자량, 또는 Abs 0.1%를 입력합니다.
3. 농도가 mg/mL로 나오고, 분자량을 알면 µM로도 나옵니다.

자주 묻는 질문

서열로 흡광 계수를 어떻게 구하나요?

Pace 등 (1995)의 방법으로, 트립토판 하나당 5,500 M⁻¹ cm⁻¹, 타이로신 하나당 1,490, 시스틴(이황화 결합한 시스테인 한 쌍) 하나당 125입니다. 시스테인이 유리 상태이면 환원형을 고르세요.

Abs 0.1%란?

1 mg/mL 용액의 280 nm 흡광도(광로 1 cm)로, 흡광 계수를 분자량으로 나눈 값입니다. 농도(mg/mL) = A280 ÷ Abs 0.1%입니다.

왜 제 단백질로는 계산되지 않나요?

트립토판도 타이로신도 없는 단백질은 280 nm에서 거의 흡수하지 않습니다. Bradford나 BCA 같은 색소 정량법을 쓰거나 205 nm에서 측정하세요.