PCR ana karışım hesaplayıcı

PCR ana karışımı nasıl hazırlanır

1. Tepkime sayısını, pipetleme kayıpları için ayrılacak fazlalığı, tepkime hacmini ve tepkime başına kalıp hacmini gir.
2. Bileşenleri kitine uyacak şekilde düzenle: her satır bir ad, stok derişimi ve istediğin son derişimdir.
3. Tablo her bileşenin tepkime başına ve bütün karışım için hacmini, hacmi tamamlayacak suyla birlikte listeler.

Sık sorulan sorular

Her hacim nasıl hesaplanıyor?

C1V1 = C2V2’den, tepkime başına hacim = son derişim ÷ stok derişimi × tepkime hacmi. Ana karışım hacmi bunun tepkime sayısı artı fazlalıkla çarpımıdır.

Neden fazlalık eklemeli?

Bir miktar sıvı tüpte ve uçlarda kalır. %10 fazlalık ya da her 10 tepkime için bir fazla tepkime, son tüpün de tam payını almasını sağlar.

Kitim 2× ana karışım. Ne girmeliyim?

Satırları «Master mix 2 1» ve primerlerinle değiştir; su satırı geri kalanı doldurur.

Polimeraz satırı birim mi kullanıyor?

Evet: stoğu U/µL olarak, son değeri tepkimenin U/µL’si olarak gir. 0,025 U/µL, 50 µL’lik bir tepkimede 1,25 U’dur; Taq için yaygın bir miktardır.