Калькулятор геля для SDS-ПААГ

Как приготовить гели для SDS-ПААГ

1. Введите концентрацию разделяющего геля и сколько геля вмещает каждая пластина, и то же для концентрирующего геля.
2. Введите число заливаемых гелей.
3. Таблица перечисляет воду, акриламид, Tris, SDS, APS и TEMED для каждого слоя геля. APS и TEMED добавляйте последними, прямо перед заливкой.

Частые вопросы

Какой рецепт используется?

Гели по Лэммли из стока акриламида/бис 30%, с 0,375 М Tris pH 8,8 в разделяющем геле и 0,125 М Tris pH 6,8 в концентрирующем, 0,1% SDS и 0,1% APS. TEMED — 0,04% в разделяющем геле и 0,1% в концентрирующем.

Какую концентрацию использовать?

Более высокие концентрации разделяют более мелкие белки. Примерно: 8% для 40–200 кДа, 10% для 20–150 кДа, 12% для 15–100 кДа и 15% для 10–70 кДа.

Сколько геля уходит на пластину?

Зависит от системы заливки и толщины спейсеров. Типичный мини-гель 1,0 мм — около 5 мл разделяющего и 2 мл концентрирующего геля; пластины 1,5 мм — примерно в полтора раза больше.

Опасен ли акриламид?

Неполимеризованный акриламид — нейротоксин. Работайте в перчатках и обращайтесь со стоком и незастывшим раствором геля осторожно.