Калькулятор калибровочной кривой
Как пользоваться калибровочной кривой
- Введите концентрацию каждого стандарта и его показание (оптическую плотность, флуоресценцию или Ct), по паре на строку.
- Введите показания неизвестных образцов и их коэффициент разведения, если вы их разводили.
- Появятся уравнение прямой и R², а в таблице — концентрация каждого неизвестного образца.
Частые вопросы
Как рассчитывается концентрация?
Через стандарты методом наименьших квадратов проводится прямая: показание = наклон × концентрация + свободный член. Каждый неизвестный образец — это (показание − свободный член) ÷ наклон, умноженное на его коэффициент разведения.
Какой R² достаточно хорош?
Для белковых или ДНК-методов обычно выше примерно 0,99. Меньшее значение указывает на ошибку пипетирования, выброс или стандарты за пределами линейного диапазона метода.
Почему отмечаются показания вне стандартов?
Прямая известна только между наименьшим и наибольшим стандартом. Показания за их пределами экстраполируются и менее надёжны; разведите концентрированные образцы и измерьте снова.
Должна ли прямая проходить через ноль?
Обычно нет: холостая проба часто сама даёт небольшое показание. Выбирайте «Через начало координат», только если холостая проба уже вычтена и вы знаете, что при нулевой концентрации отклик нулевой.