SDS-PAGE জেলের হিসাব

SDS-PAGE জেল কীভাবে বানাবেন

1. রেজলভিং জেলের শতাংশ আর প্রতিটি প্লেটে কত জেল ধরে তা লিখুন, আর স্ট্যাকিং জেলের জন্যও একইভাবে।
2. আপনি কতগুলো জেল ঢালছেন তা লিখুন।
3. টেবিলটি প্রতিটি জেলের স্তরের জন্য পানি, অ্যাক্রিলামাইড, ট্রিস, SDS, APS আর TEMED তালিকায় আনে। APS আর TEMED সবার শেষে, ঢালার ঠিক আগে দিন।

সাধারণ প্রশ্ন

এটি কোন পদ্ধতি ব্যবহার করে?

30% অ্যাক্রিলামাইড/বিস স্টক থেকে লেমলি জেল, রেজলভিং জেলে 0.375 M ট্রিস pH 8.8 আর স্ট্যাকিং জেলে 0.125 M ট্রিস pH 6.8, সঙ্গে 0.1% SDS আর 0.1% APS। TEMED রেজলভিং জেলে 0.04% আর স্ট্যাকিং জেলে 0.1%।

কোন শতাংশ নেব?

বেশি শতাংশ ছোট প্রোটিন আলাদা করে। মোটামুটি: প্রায় 40 থেকে 200 kDa-র জন্য 8%, 20 থেকে 150 kDa-র জন্য 10%, 15 থেকে 100 kDa-র জন্য 12% আর 10 থেকে 70 kDa-র জন্য 15%।

একটি প্লেটে কত জেল লাগে?

ঢালার ব্যবস্থা আর স্পেসারের পুরুত্বের ওপর নির্ভর করে। চেনা একটি 1.0 মিমি মিনি জেলে লাগে প্রায় 5 মিলি রেজলভিং জেল আর 2 মিলি স্ট্যাকিং জেল; 1.5 মিমি প্লেটে তার প্রায় দেড় গুণ।

অ্যাক্রিলামাইড কি বিপজ্জনক?

পলিমার না হওয়া অ্যাক্রিলামাইড একটি স্নায়ুবিষ। দস্তানা পরুন, আর স্টক ও না-জমা জেলের দ্রবণ সাবধানে নাড়াচাড়া করুন।