PCR মাস্টার মিক্সের হিসাব

একটি PCR মাস্টার মিক্স কীভাবে বানাবেন

1. কতগুলো বিক্রিয়া, পিপেটিংয়ে নষ্টের জন্য কত বাড়তি, বিক্রিয়ার আয়তন আর প্রতি বিক্রিয়ায় টেমপ্লেটের আয়তন লিখুন।
2. আপনার কিটের সঙ্গে মেলাতে উপাদানগুলো সম্পাদনা করুন: প্রতিটি লাইনে একটি নাম, তার স্টকের ঘনমাত্রা আর আপনি যে শেষের ঘনমাত্রা চান।
3. টেবিলটি প্রতিটি উপাদানের আয়তন প্রতি বিক্রিয়ায় আর পুরো মিশ্রণের জন্য তালিকায় আনে, সঙ্গে আয়তন ভরে নেওয়ার পানি।

সাধারণ প্রশ্ন

প্রতিটি আয়তন কীভাবে বের হয়?

C1V1 = C2V2 থেকে, প্রতি বিক্রিয়ায় আয়তন = শেষের ঘনমাত্রা ÷ স্টকের ঘনমাত্রা × বিক্রিয়ার আয়তন। মাস্টার মিক্সের আয়তন হলো তা গুণ বিক্রিয়ার সংখ্যা, সঙ্গে বাড়তিটুকু।

বাড়তি দেব কেন?

কিছু তরল নলে আর টিপে লেগে থেকে যায়। 10% বাড়তি, কিংবা প্রতি 10টিতে একটি বাড়তি বিক্রিয়া, শেষ নলটিও যাতে তার পুরো ভাগ পায় তা নিশ্চিত করে।

আমার কিটটি একটি 2× মাস্টার মিক্স। কী লিখব?

লাইনগুলোর জায়গায় “Master mix 2 1” আর আপনার প্রাইমারগুলো বসিয়ে দিন; পানির লাইনটি বাকিটা ভরে নেয়।

পলিমারেজের লাইনটি একক ব্যবহার করে?

হ্যাঁ: স্টকটি U/µL-এ আর শেষেরটি বিক্রিয়ার প্রতি µL-এ U-তে লিখুন। 0.025 U/µL মানে 50 µL বিক্রিয়ায় 1.25 U, যা Taq-র জন্য একটি চেনা পরিমাণ।