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Como calcular a porcentagem de identidade e de similaridade

Identidade e similaridade

As duas são lidas de um alinhamento, coluna por coluna. A porcentagem de identidade é a parcela de colunas em que as duas sequências têm o mesmo resíduo. A porcentagem de similaridade conta também as colunas em que os resíduos diferem mas são quimicamente parecidos, como leucina contra isoleucina ou aspartato contra glutamato. Similaridade só faz sentido para proteínas; para DNA, o número a usar é a identidade.

O denominador importa

Duas sequências com 90 colunas idênticas podem ser relatadas como 90% idênticas num alinhamento de 100 colunas, 75% sobre a sequência mais longa de 120 resíduos, ou 95% sobre as 95 colunas sem gaps. As ferramentas diferem:

  • O BLAST divide pelo comprimento do alinhamento, incluindo gaps.
  • O EMBOSS Needle faz o mesmo, mas relata os gaps à parte.
  • Algumas ferramentas dividem pela sequência mais curta, o que infla o número de um fragmento curto que coincide com parte de uma proteína longa.

Ao citar um valor, diga por que ele foi dividido e se o alinhamento foi global ou local.

Quais resíduos são similares

Os grupos de similaridade costumam seguir as pontuações positivas da matriz BLOSUM62. Grupos comuns: I, L, V e M; F, Y e W; K, R e H; D e E; N e Q; S e T; A e G. A maioria das ferramentas mostra a regra que usa; a ferramenta Identidade e similaridade daqui marca separadamente as colunas idênticas e as similares.

O que os números significam

Duas proteínas mais de 30% idênticas em todo o comprimento são quase sempre homólogas e compartilham o enovelamento. Entre 20 e 30% é a zona crepuscular, onde um alinhamento pode ser real ou acaso, e o valor E estatístico de uma busca em banco de dados é o melhor guia. O DNA diverge mais rápido nas posições silenciosas, então dois genes que codificam proteínas quase idênticas podem ser apenas 70% idênticos no nível do DNA.

Calcule

  1. Alinhe as sequências com Alinhar duas proteínas ou Alinhar dois DNA, ou cole um alinhamento que você já tenha.
  2. Cole as sequências alinhadas em Identidade e similaridade. Ela conta as colunas idênticas e similares e relata as duas porcentagens com o comprimento do alinhamento.

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