C1V1 = C2V2
При разведении количество растворённого вещества не меняется, поэтому концентрация × объём до и после одинаковы. C1 и V1 — концентрация исходного раствора и взятый его объём; C2 и V2 — нужные концентрация и объём.
Чтобы получить 10 мл 1 M из 5 M исходного раствора: V1 = C2 × V2 ÷ C1 = 1 × 10 ÷ 5 = 2 мл исходного раствора, доведённые 8 мл воды или буфера до 10 мл.
C1 и C2 должны быть в одних единицах, V1 и V2 — тоже.
Коэффициенты разведения
Разведение 1:10 — это 1 часть исходного раствора в 10 частях общего объёма, например 100 мкл исходного раствора плюс 900 мкл разбавителя. Учтите, что «1:10» иногда означает 1 часть плюс 10 частей, так что проверьте, что имеется в виду в протоколе.
Серийные разведения
Для очень больших разведений разводите поэтапно. Шесть шагов по 1:10 переводят образец с 108 до 102 клеток на мл — разведение в 106 раз — с объёмами, которые легко отбирать пипеткой. Хорошо перемешивайте каждую пробирку перед следующим переносом и меняйте наконечники между пробирками.
Калькуляторы
Калькулятор разведения решает C1V1 = C2V2 для любой из четырёх величин и сам переводит единицы. Калькулятор серийных разведений показывает концентрацию в каждой пробирке и сколько переносить и добавлять.
Ещё разобранные примеры
- Буфер 10× до 1×: для 500 мл V1 = 1 × 500 ÷ 10 = 50 мл буфера 10×, доведённые до 500 мл.
- 70% этанол из 95%: для 100 мл V1 = 70 × 100 ÷ 95 = 73,7 мл 95% этанола, доведённые до 100 мл.
Этанол и вода при смешивании немного сжимаются, поэтому 73,7 мл плюс 26,3 мл воды дают чуть меньше 100 мл. Доливайте до метки цилиндра или колбы, а не добавляйте фиксированный объём воды.
Частые ошибки
- Добавить V2 вместо доведения до V2. V2 — конечный общий объём. 10 мл воды к 2 мл стока дают 12 мл другой концентрации.
- Объёмы слишком малы для пипетирования. Ниже примерно 1 мкл пипетирование неточно. Сначала сделайте промежуточное разведение.
- Разные единицы. Сток в мг/мл и цель в мкг/мл различаются в 1000 раз. Переведите одно перед использованием формулы.